





外泌體可通過多種小分子進行修飾,因此逐漸成為遞送治1療藥1物的有效載體。研究發(fā)現,GRP78 在索拉菲尼耐藥癌細胞中,相對于索拉菲尼敏感癌細胞中顯著過表達,因此,可能是 HCC 治1療的潛在靶點。
在這項研究中,錦州醫(yī)學院趙亮課題組通過修飾 BM-MSCs 以表達外泌體 siGRP78,證明了 siGRP78 修飾的外泌體與索拉1非尼聯合能夠靶向肝細胞癌細胞中的 GRP78 并抑制其生長和體外癌細胞的侵襲。此外,siGRP78 修飾外泌體與索拉1非尼聯合也抑制體內癌細胞的生長和轉移。證明了 siGRP78 修飾的外泌體可以使索拉1非尼耐藥的癌細胞對索拉1非尼敏感并逆轉耐藥性。
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據國際細胞外囊泡學會(ISEV)在2014年的提議,外泌體鑒定3個標志:透射電鏡(transmission electron microscope,外泌體電鏡檢測,TEM)、粒徑(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白標志物(Western Blot, WB)。
外泌體透射電鏡TEM鑒定外泌體大小、形態(tài),判斷樣本是否含有外泌體。
外泌體透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察,可觀測樣本中是否存在外泌體樣結構(通常為茶托型或一側凹陷的半球形),同時可測量外泌體大小。
檢測平臺:TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
檢測結果:三張透射電鏡圖片,盡可能體現完整的外泌體形態(tài)(如有)
檢測周期:10-15個工作日

樣本準備
1. 提供外泌體懸液即可,未純化樣本也可以上機檢測;
注意:NTA僅提供粒徑分布情況和顆粒濃度,無法區(qū)分外泌體與非外泌體成分;當然也可先利用外泌體特異性標記物進行熒光標記,則可以獲知外泌體特定亞群的含量。
2.儀器的檢測區(qū)間是10^7 particles/ml,外泌體電鏡,且有濃度檢測下限,為10^5 particles/ml,進樣量不少于2ml;一般來說,外泌體電鏡測試服務,會對樣本稀釋后進樣;
我司無法準確建議送樣量;檢測需要量與樣本本身濃度有關,樣本濃,則用量小,反之則多,根據檢測經驗,樣本取用量一般在2μl-100μl不等,外泌體電鏡檢測服務,取用量大于50μl時大多由于樣本分泌量過低、提取失敗或者對樣本有過多稀釋。一般建議送樣量不低于30μl,如樣本珍貴,可聯系我司寄回,運費視具體情況收取。

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