全自動核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,微型全自動核酸提取儀價格,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能完全的抽走,微型全自動核酸提取儀,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉移到下一個步驟相應的反應孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨立溫控,這樣可以設置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機要能帶動磁棒進行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。
全自動核酸提取儀——原理介紹
磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結
1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉移液體來實現(xiàn)核酸的提取,一般通過操作系統(tǒng)控制機械臂來實現(xiàn)轉移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現(xiàn)反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,微型全自動核酸提取儀多少錢,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質,在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通過固定液體,轉移磁珠來實現(xiàn)核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,微型全自動核酸提取儀生產(chǎn)廠家,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現(xiàn)核酸的提取。
全自動核酸提取儀的應用領域
全自動核酸提取儀應用領域:幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且不可缺少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發(fā)展對高通量樣品進行提取純化的需求。
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